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目的：构建并筛选有效的、编码2条shRNA的乙酰肝素酶（Hpa）特异性基因真核表达载体．方法：分别设计、化学合成6对寡核苷酸单链，经退火、连接和磷酸化后得到Hpa shRNA双链，将两两随机问隔4～8个碱基后定向克隆入带有各自的U6启动子和终止码、共同的绿色荧光蛋白（green fluoreseent protein，EGFP）基因和Neo基因的pGenesil-1中，构建3条含两段Hpa基因shRNA的pGenesil-1-Hpa—shRNA真核表达载体，转染卵巢癌细胞株SKOV3，流式细胞仪和荧光显微