目的 观察氟中毒大鼠成骨细胞Wnt3a、β-链蛋白(catenin)mRNA和蛋白表达,探讨氟骨症发生与Wnt通路的关系.方法 健康SD大鼠36只,体质量100～120 g,按体质量将大鼠随机分为3组,每组12只.对照组大鼠饮用自来水(含氟量＜1 mg/L),低氟组、高氟组大鼠分别饮用含5、50 mg/L氟化钠的自来水.大鼠饲养8个月,建立慢性氟中毒模型.饲养期间检查大鼠氟斑牙发生情况,股动脉放血处死大鼠前收集大鼠24 h尿样,处死后取股骨组织.采用氟离子选择电极法测定尿氟和骨氟含量；固相夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清骨碱性磷酸酶(BALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)含量；光镜下观察骨组织的形态学变化,测量骨皮质厚度、骨小梁宽度及密度变化；原位杂交技术和免疫组化方法检测成骨细胞Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白表达.结果 大鼠氟斑牙检出率低氟组为66.7％(8/12),高氟组为91.7％(11/12),对照组为0.0％(0/12),组间比较差异有统计学意义(χ2=21.6,P＜0.05).尿氟和骨氟组间比较差异有统计学意义(F=36.57、467.02,P均＜0.05),其中低氟组[(2.06±0.64)mg/L、(632.33±123.21) mg/kg]和高氟组[(7.69±1.96)mg/L、(1088.75±156.16)mg/kg]高于对照组[(1.26±0.17)mg/L、(305.58±91.26)mg/kg,P均＜0.05],高氟组高于低氟组(P均＜ 0.05).血清BALP和TRACP-5b组间比较差异有统计学意义(F=89.57、7.68,P均＜0.05).其中低氟组[(31.47±5.30)U/L]和高氟组[(54.61±2.27)U/L].血清BALP明显高于对照组[(16.24±1.57)U/L,P均＜0.05],高氟组高于低氟组(P＜0.05)；血清TRACP-5b,低氟组[(3.45±1.85)U/L)明显高于对照组[(1.26±0.23)U/L]和高氟组[(2.74±1.8)]U/L,P均＜0.05].光镜下,高氟组和低氟组大鼠股骨骨皮质较对照组增厚,骨小梁增宽、排列紧密.原位杂交和免疫组化显示,近骨小梁表面的成骨细胞细胞质和细胞核呈棕黄色阳性着色.图像分析显示,Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白表达组间比较差异有统计学意义(F值分别为12.47、5.96,10.07、53.82,P均＜0.05).其中低氟组(132.87±5.72、132.57±9.56,137.50±4.32、140.85±3.54)和高氟组(135.60±6.64、137.87±9.16,142.65±11.84、152.52±4.64)均高于对照组(119.86±5.04、120.58±7.84,124.01±2.63、126.75±4.65,P均＜0.05)；除β-catenin蛋白表达高氟组明显高于低氟组(P＜0.05)外,其他两组间比较差异无统计学意义(P均＞0.05).相关分析显示,Wnt3amRNA与β-catenin mRNA表达、Wnt3a蛋白与β-catenin蛋白表达,二者之间都具有相关性(r值分别为0.731、0.658,P均＜0.05).结论 过量氟引起的大鼠骨组织的病变可能与Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白在成骨细胞的表达增高有关.慢性氟中毒时,氟通过刺激Wnt经典信号通路中Wnt3a、β-catenin的过表达,使成骨作用增强,从而引起骨骼的病变而发生氟骨症。