论文部分内容阅读
目的：改建布鲁氏菌自杀载体方法：用INdeⅠ将pKOBEG—SacB质粒中的反向筛选基NsacB切下来，与同样酶切处理的pUC19质粒连接，得到pUC19-SacB，经测序和蔗糖筛选实验证实．结果：成功将SacBZXpKOBEG．SacB中切下来并插入到puC19质粒中，构建得到了pUC19-SacB．测序和蔗糖筛选实验证实．插入的sacB基因具有较好的反筛功能．我们利用该质粒，成功的构建了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统的突变株，改建的载体能高效的应用于布鲁氏菌染色体的精确修饰．结论：构建了一个新的自杀质粒pUC1