【摘 要】
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地毯草黄单胞菌大豆致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.glycines,Xag)引起大豆斑疹病,是大豆上重要的细菌病害之一。大豆斑疹病菌通过Ⅲ型分泌系统(type-Ⅲ secretion syst
【基金项目】
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上海交通大学27期PRP项目(T150PRP27002);国家自然科学基金项目(31471742)
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地毯草黄单胞菌大豆致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.glycines,Xag)引起大豆斑疹病,是大豆上重要的细菌病害之一。大豆斑疹病菌通过Ⅲ型分泌系统(type-Ⅲ secretion system,T3SS)将包括转录类似激活因子(transcription activator-like(tal)effectors,TALEs)在内的效应蛋白(T3SS-secreted effectors,T3SEs)注入寄主植物细胞中,从而使寄主植物产生抗病性或感病性反应。为了研究不同tal基因在Xag致病性中的作用,选择ATCC43911菌株为研究对象,根据tal基因的高度保守性,构建了可用于同源交换的含转座子Tn5的pB-C8B::Tn5质粒。通过电转化法转入受体菌细胞中,再进行Km抗性筛选,获得了tal基因插入突变体。Southern杂交结果显示,ATCC43911菌株含有6个tal基因,在Tn5转座子插入后,tal基因的位置发生了变化,杂交信号条带数目增加,并且存在Tn5的单拷贝和双拷贝插入2种形式。这表明Tn5转座子成功插入了tal基因。Tn5插入突变体的构建为进一步分离tal基因以及鉴定其在致病性中的作用奠定了工作基础。
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