表达荧光素酶报告基因稳定细胞系的建立及对CBLB502活性的检测

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wentoume

【摘要】

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目的建立表达NF-κB-RE-luc2P荧光素酶报告基因的稳定细胞系以检测CBLB502的活性。方法利用脂质体转染试剂Lipofectin2000将含有NF-κB报告基因的质粒NF-κB-RE-luc2P转染入

【作者】

：

汤立宣王治东许望翔葛常辉杨晓明

【机构】

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安徽医科大学病理生理学教研室,军事医学科学院放射与辐射研究所

【出处】

：

安徽医科大学学报

【发表日期】

：

2011年4期

【关键词】

：

荧光素酶类 NF-ΚB 潮霉素B luciferases NF-kappa B hygromycin B

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目的建立表达NF-κB-RE-luc2P荧光素酶报告基因的稳定细胞系以检测CBLB502的活性。方法利用脂质体转染试剂Lipofectin2000将含有NF-κB报告基因的质粒NF-κB-RE-luc2P转染入人胚肾细胞（HEK293细胞）,并通过潮霉素B进行克隆筛选,最后挑取单克隆进行放大并应用荧光素酶检测方法进行鉴定。结果经200μg/ml的潮霉素B筛选,得到所需要的单克隆株,鉴定并保存。应用该潮霉素抗性单克隆细胞系对基于NF-κB信号通路的新型抗辐射蛋白药物CBLB502活性的检测显示出良好的量效关

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