【摘 要】
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目的:研究黄芩素对中波紫外线(UVB)诱导角质形成细胞凋亡及相关细胞因子表达的影响。方法:体外培养人皮肤角质形成细胞(HaCaT),取对数生长期的细胞,随机分为空白组、模型组和黄芩
【机 构】
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黑龙江中医药大学; 四川省中西医结合医院; 内江市中医医院;
【基金项目】
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黑龙江省应用技术研究与开发计划项目(PC13S15)
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目的:研究黄芩素对中波紫外线(UVB)诱导角质形成细胞凋亡及相关细胞因子表达的影响。方法:体外培养人皮肤角质形成细胞(HaCaT),取对数生长期的细胞,随机分为空白组、模型组和黄芩素组,并用30 mJ·cm-2的UVB照射模型组和黄芩素组,建立光老化模型。噻唑蓝(MTT)比色法筛选黄芩素的有效安全浓度,并测定黄芩素对光老化HaCaT细胞增殖率的影响;活性氧自由基(ROS)试剂盒测定各组细胞中ROS含量;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒测定各组细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定各组细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),半胱氨酸天冬氨酸-3(Caspase-3)及Caspase-9蛋白表达水平。结果:筛选出1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1黄芩素为最佳有效安全浓度。与空白组比较,模型组ROS含量和细胞凋亡率显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Caspase-3及Caspase-9蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1黄芩素组ROS含量和细胞凋亡率显著降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),Caspase-3及Caspase-9蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芩素可以通过降低细胞ROS含量和凋亡率,调控Bcl-2家族中抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,降低凋亡相关细胞因子Caspase-3和Caspase-9的表达水平,抑制UVB诱导的细胞凋亡。
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