【摘 要】
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用稳定过表达并带有myc表位的葡萄糖转运子1(glucose transporter1,GLUT1)或葡萄糖转运子4(glucose transporter4,GLUT4)的L6骨骼肌细胞株定征GLUT1和GLUT4对胰岛素的响应.所
【机 构】
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天津医科大学免疫学教研室; Programmein CellBiology The Hospital for Sick Children; Toronto; Canada
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(批准号:30570912);国家自然科学基金中加(NSFC-CIHR)健康研究合作项目(批准号:30611120532);天津市科学技术委员会应用基础研究重点项目(批准号:07JCZDJC07900和06YFGPSH03300);天津市高等学校科技发展基金(批准号:20040106)资助
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用稳定过表达并带有myc表位的葡萄糖转运子1(glucose transporter1,GLUT1)或葡萄糖转运子4(glucose transporter4,GLUT4)的L6骨骼肌细胞株定征GLUT1和GLUT4对胰岛素的响应.所筛选的L6-GLUT1myc细胞克隆分化前后的葡萄糖摄取量均在线性范围.100nmol/L胰岛素使L6-GLUT1myc和L6-GLUT4myc肌原细胞膜上GLUT1或GLUT4的量分别达到基础组的(1.58±0.01)倍和(1.96±0.11)倍,2-脱氧葡萄糖摄取量分别达到了(1.53±0.09)倍和(1.86±0.17)倍,此作用可被渥曼青霉素(wortmannin)抑制.胰岛素刺激了此2种细胞中的Akt磷酸化.L6-GLUT1myc肌原细胞的葡萄糖摄取量对胰岛素浓度呈剂量依赖性,但与野生型细胞相比,其对胰岛素的敏感性和最大响应没有改变.但L6-GLUT4myc肌原细胞的葡萄糖摄取量对胰岛素的敏感性和最大响应均增加.以前的研究提示毛喉素(forskolin)可能影响胰岛素刺激的GLUT4转位.本研究表明,在L6-GLUT4myc细胞中,毛喉素使胰岛素刺激的葡萄糖摄取减少了65%,此作用是由它对GLUT4的直接抑制而不是由其对GLUT4转位的影响造成的.毛喉素和dipyridamole对GLUT4比对GLUT1有更强的抑制作用,而戊巴比妥(pentobarbital)对GLUT1的抑制作用强于GLUT4.应用这些抑制剂的结果表明、L6肌原细胞中基础状态下和胰岛素刺激状态下的葡萄糖主要由过表达的GLUT1或GLUT4转运.因此,L6-GLUT1myc和L6-GLUT4myc细胞株为筛查对肌肉细胞GLUT1或GLUT4的活性或转位有不同作用的化合物提供了一个平台.
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