【摘 要】
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目的:寻找到一种简便、快速、可靠、有效的古DNA抽提方法。方法:选择基于硅粒法和硅离心柱法的四种抽提方法(方法A:Modified Silica Particles Method;方法B:Ceneclean Metho
【机 构】
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吉林大学边疆考古研究中心古DNA实验室,吉林大学生命科学学院大分子实验室,吉林大学化学学院化学教学与研究中心
【基金项目】
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国家基础学科人才培养基金资助课题(J0530184)
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目的:寻找到一种简便、快速、可靠、有效的古DNA抽提方法。方法:选择基于硅粒法和硅离心柱法的四种抽提方法(方法A:Modified Silica Particles Method;方法B:Ceneclean Method;方法C:QIAampMethod;方法D:Modified QIAquick method))分别抽提5个距今约4 000年的古绵羊线粒体DNA(mtDNA),并进行PCR扩增,通过琼脂糖凝胶电泳观察扩增成功与否,根据扩增成功率判断抽提方法的优劣。结果:4种方法的扩增成功率从20%~100%,基于硅离心柱法的抽提效果(60%,100%)明显的优于基于硅粒法(20%,40%),其中Modified Silica Particles Method的效果最差(20%),Modified QIAquick Method的效果最好(100%)。结论:Modified QIAquick Method方法使用Centricon超滤管浓缩DNA抽提裂解液,结合硅离心柱进行DNA纯化,能有效去除PCR抑制物,同时得到较好的古DNA模板。
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