小鼠胸腺中的早期T细胞（Thy-1⁺Ly2^-L3T4^-），经FACS或抗体杀伤阴性选择法分离出，以有限稀释法培养于无支持细胞培基中，在PMA及Calcium Ionophore刺激下，IL2等细胞因子提供下，细胞增殖并功能分化，可在克隆水平上测出对靶细胞的杀伤作用，算出杀伤T细胞的前体细胞（CTL-p）的频数。早期T细胞中，对同种异型抗原特异应答（Alloreactive. H-2^kαH-2^d）的CTL-p频数为0.0099±0，0021；经PHA介导测出的全部CTL-p频数为0.0158±0.0018，Alloreactive CTL-p占全部CTL-p的63%。在平行试验中，考的松耐受胸腺细胞（CRT）中的Alloreactive（H-2^kαH-2^d）CTL-p频数为0.016±0.007；全部CTL-p为0.130±0.007，Alloreactive CTL-p占全部CTL-p的12.3%。提示早期T细胞中，Alloreactive CTL-p发育较早。但本实验不能排除NK细胞的作用，故在早期T细胞的CTL-p中，至少有1/3为抗原特异应答CTL-p。

体外培养后，早期T细胞亦发生表现型改变，产生三种较为成熟的胸腺细胞亚群：Ly2⁺L3T4⁺、Ly2⁺L3T4^-及Ly2^-L3T4⁺，但60%仍为Ly2^-L3T4^-。