目的研制钐(Sm)标记检测总前列腺特异性抗原(tPSA)及铕(Eu)标记检测游离前列腺特异性抗原(fPSA)的双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)试剂盒。方法以抗PSA单克隆抗体101#包被96孔微孔板,用Sm3+标记抗tPSA单克隆抗体102#、Eu3+标记抗fPSA单克隆抗体201#,采用双抗体夹心法建立t/fPSA双标记TRFIA。标准曲线由TRFIA检测仪自带的Log-Log_B函数处理。结果tPSA批内和批间变异系数(CV)分别为2.38%和3.91%,最低检测下限0.02μg/L,可测范围为0.02~250μg/L,回收率为101.3%;fPSA批内和批间CV分别为3.16%和3.34%,最低检测下限0.05μg/L,可测范围为0.05~250μg/L,回收率为103.2%。t/fPSATRFIA试剂盒测定健康组、前列腺良性疾病组和前列腺癌组(Pca)的tPSA平均值为1.4μg/L、4.3μg/L、14.2μg/L,fPSA平均值为0.3μg/L、1.5μg/L、6.2μg/L。tPSA3.6μg/L、f/tPSA<0.21为Pca与良性疾病的鉴别阈值。自制试剂盒与PE公司进口试剂盒同时测定血清样本,二者tPSA与fPSA的相关系数分别为0.99和0.97。结论自制t/fPSATRFIA试剂盒的各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品。