【摘 要】
：
探讨羊毛固醇合成酶(LSS)基因敲除鼠的繁育和基因型分析.将引进杂合子小鼠进行饲养并繁育,提取其基因组DNA,利用PCR反应扩增目的 基因片段,鉴定出小鼠的基因型;Westem blot分析并比较LSS基因敲除杂合子小鼠和野生型小鼠的肝脏、皮肤组织中LSS蛋白的表达情况.成功的繁育出LSS基因敲除小鼠,使用PCR鉴定其子代小鼠包括野生型(LSS+/+,Wt)、杂合子(LSS+/-),未出现纯合敲除小鼠;Western blot结果表明:相较于野生型小鼠,LSS基因敲除杂合子小鼠在肝组织和皮肤组织中表达LS
【机 构】
：
安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,合肥230032
论文部分内容阅读
探讨羊毛固醇合成酶(LSS)基因敲除鼠的繁育和基因型分析.将引进杂合子小鼠进行饲养并繁育,提取其基因组DNA,利用PCR反应扩增目的 基因片段,鉴定出小鼠的基因型;Westem blot分析并比较LSS基因敲除杂合子小鼠和野生型小鼠的肝脏、皮肤组织中LSS蛋白的表达情况.成功的繁育出LSS基因敲除小鼠,使用PCR鉴定其子代小鼠包括野生型(LSS+/+,Wt)、杂合子(LSS+/-),未出现纯合敲除小鼠;Western blot结果表明:相较于野生型小鼠,LSS基因敲除杂合子小鼠在肝组织和皮肤组织中表达LSS蛋白量少;杂合子敲除鼠的生存能力比野生型小鼠弱.获得LSS基因敲除小鼠,PCR鉴定小鼠基因型具有简单、稳定的优点.
其他文献
为研究组合锤法强夯振动对周边场地环境的影响,对南昌市某软土地基进行现场原位试验。考虑距强夯点的距离、振动方向及锤击次数的影响,在各监测点分别布置水平东西、南北向和竖向振动传感器。结果表明:采用组合锤法进行地基强夯施工时,场地竖向振动是需重点监测的内容,振动响应随监测点与强夯点距离的增大而减小;距强夯点50 m范围处地面振动速度衰减至0.2 cm/s以下,可根据地面振动速度确定安全施工范围;地面加速度受锤击次数的影响较大,且水平向加速度对锤击次数的敏感性略高于竖向,锤击次数对地面水平向振动的影响不可忽略;基
目的 通过移植人脐带来源的间充质干细胞(hUC-MSCs)治疗缺氧缺血诱导的新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE),并探讨hUC-MSCs对神经细胞的保护作用及机制.方法 采集足月健康新生儿脐带约10 cm,运用组织块贴壁法培养hUC-MSCs,通过感染重组携带绿色荧光蛋白的腺病毒标记细胞;取18只新生健康7d龄SD大鼠,随机均分为对照(假手术)、模型、治疗组,其中模型组及治疗组建立新生大鼠缺氧缺血脑损伤模型,建模成功24 h后将标记的hUC-MSCs注射入治疗组左侧(损伤侧)侧脑室,各组大鼠hUC-MSCs移
目的探讨脱氢表雄酮(DHEA)及褪黑素在继发性早泄(APE)患者外周血的表达情况及临床意义。方法采用qPCR及ELISA检测27例APE患者和30例对照组外周血DHEA基因及褪黑素受体1基因的表达以及DHEA和褪黑素在血清中的分泌浓度,并分析两者之间的差异及其与疾病的相关性。两组间比较采用t检验或者非参数检验,两变量之间相关性采用Pearson或Spearman相关分析。结果早泄组的外周血中DHEA的基因表达低于对照组(P<0.01),褪黑素受体1的基因表达低于对照组(P<0.01),差异均有
目的分析高血压与肾透明细胞癌(ccRcc)发病风险及病理特征的相关性。方法回顾性分析201例ccRCC患者的相关临床资料,1005例在安庆附属医院体检中心体检的正常人群作为对照组。比较两组人群在代谢综合征、吸烟等资料的差异;应用Logistics多因素回归分析,分析高血压与肾癌的相关性,并将肾癌组分为合并高血压组(A组)与非高血压组(B组),分析相关的病理资料的差异。结果对照组与ccRCC组总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、尿酸比较差异无统计学意义。2组的高血压、肥胖、糖尿病、吸烟人数占比进
目的探讨高尔基体蛋白73(GP73)和热休克蛋白90α(HSP90α)在低浓度甲胎蛋白(AFP)原发性肝癌(PHC)诊断中的应用价值。方法收集150例血清,其中AFP低浓度PHC患者50例,肝硬化患者30例,肝炎患者30例,健康对照者40例。采用ELISA方法检测各组人群血清GP73和HSP90α含量,比较各组间GP73和HSP90α水平。结果AFP低浓度PHC患者中,血清GP73和HSP90α含量以及阳性检出率高于肝硬化、肝炎、健康对照者,差异有统计学意义(P均<0.01)。有淋巴结转移和门脉侵犯
目的通过制备特异性抗牙龈卟啉单胞菌卵黄抗体脂质体(抗Pg-IgY脂质体),探讨特异性抗Pg-IgY脂质体对牙周主要致病菌牙龈卟啉单胞菌体外抑菌效果。方法采用薄膜分散法制备抗Pg-IgY脂质体。使用透射电子显微镜观察抗Pg-IgY脂质体外观表征,纳米粒径分析仪测定抗Pg-IgY脂质体的Zeta电位(ζ-电位)和粒径,利用超滤离心法测量其包封率。采用微量液体稀释法研究抗Pg-IgY脂质体对牙龈卟啉单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)并绘制其kill-time曲线。结果测得抗Pg-IgY脂质体
目的探讨L-半胱氨酸(L-cys)增加内源性H2S对间歇性低氧引起的大鼠高血压的影响及机制。方法将雄性SD大鼠随机分为正常氧(Control)组、慢性间歇性低氧(CIH)组、正常氧L-cys干预(Control+L-cys)组和慢性间歇性低氧L-cys干预(CIH+L-cys)组。CIH组和CIH+L-cys组大鼠放入低氧仓进行间歇性低氧处理,每天8 h,连续15 d。L-cys干预组每天给予L-cys(10 mg/kg)灌胃。用无创套尾法测大鼠的尾动脉收缩压(SBP),PowerL
探讨IPS e-max Press牙合贴面修复后牙体的抗折性及断裂模式。将7例离体下颌前磨牙牙合面均匀磨除1.5 mm,模拟前磨牙在重度磨耗下的牙合面形态,用IPS e-max Press材料制作牙合贴面至备牙前形态。粘接剂粘接后进行静态压力加载,记录断裂载荷值及断裂形式。试件断裂载荷值远大于正常咀嚼力,可满足临床修复需求。断裂形式多局限于修复体的碎裂或局限于小范围牙体破坏,利于二次修复。IPS e-max Press牙合贴面是一种微创的,较理想的重度磨耗前磨牙的修复方式。
目的探讨富含半胱氨酸的酸性分泌糖蛋白(Sparc蛋白)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)、正常人成纤维细胞(NFs)增殖与凋亡以及对于其细胞外基质中Ⅰ胶原与Ⅲ型胶原表达的影响。方法分离培养HKF以及NFs,将2种细胞分为实验组与对照组,实验组加入Sparc蛋白孵育,对照组加入等量培养基进行处理。CCK-8细胞增殖实验检测Sparc蛋白对各组细胞增殖的影响;流式细胞实验检测Sparc蛋白对各组细胞凋亡的影响;Western blot与RT-PCR检测各组细胞Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原的表达。结果Sparc蛋白可以显著
目的研究长链非编码RNA(LncRNA)H19对雨蛙素刺激的大鼠胰腺腺泡细胞AR42J细胞凋亡的影响。方法在体外通过用雨蛙素刺激AR42J细胞建立AP模型,采用qRT-PCR和Western blot检测沉默以及过表达H19后凋亡相关基因Caspase 3及Caspase 9的mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。结果H19沉默后,凋亡相关基因Caspase 3及Caspase 9的mRNA和蛋白水平下降,细胞凋亡率也相对减少(P<0.05);而过表达H19后,Caspase 3及