【摘 要】
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为鉴定含J亚群禽白血病病毒(ALV-J)全长cDNA分子克隆(pBlALV)的感染性,首先将pBlALV转染CEF细胞,拯救出病毒(rALV),然后连续传代3次,对拯救病毒进行增殖培养。分别利用RT-PCR、west
【机 构】
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甘肃农业大学动物医学院,中国农业科学院上海兽医研究所,惠州出入境检验检疫局
【基金项目】
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公益性农业科研专项(201003012), 863计划(2011AA10A200), 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2010JB18)
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为鉴定含J亚群禽白血病病毒(ALV-J)全长cDNA分子克隆(pBlALV)的感染性,首先将pBlALV转染CEF细胞,拯救出病毒(rALV),然后连续传代3次,对拯救病毒进行增殖培养。分别利用RT-PCR、westernblot、IFA等方法,对拯救病毒进行鉴定,并应用实时荧光定量PCR方法对拯救病毒的复制动力学进行了测定。研究结果证明,本研究成功拯救出了具有感染性的rALV-J,为研究禽白血病的致病机理和探讨新的防制措施等提供了良好的ALV的反向遗传操作技术平台。
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