大肠杆菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆与表达

来源 :中国药科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hamainini
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应用PCR技术从E.coli JM 109中扩增出长约1.1kb的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因,将其插入高表达载体pET11c的NdeI和BamHI位点中,转化E.coli BL 21 (DE3)。SDS-PAGE和薄层扫描结果表明,重组菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶的表达量占菌体总可溶性蛋白含量的58.3%。酶活测定结果表明,重组菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶的活力比宿主菌高7倍。 A 1.1 kb S-adenosylmethionine synthetase gene was amplified from E. coli JM109 by PCR and inserted into the NdeI and BamHI sites of the high expression vector pET11c and transformed into E. coli BL 21 (DE3). The results of SDS-PAGE and TLC showed that the recombinant S-adenosylmethionine synthetase accounted for 58.3% of the total soluble protein content. The results of enzyme activity assay showed that the activity of recombinant S-adenosylmethionine synthetase was 7 times higher than that of host bacteria.
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