【摘 要】
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观察利用融合表达载体pET28-Trx合成的人血小板源性生长因子B(Human platelet-derived growth factor B,h PDGF-B)免疫原的免疫原性,及其诱导小鼠产生针对h PDGF-B的腹水抗体
【基金项目】
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陕西省社会发展攻关项目(No.S2013SF3884)资助~~
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观察利用融合表达载体pET28-Trx合成的人血小板源性生长因子B(Human platelet-derived growth factor B,h PDGF-B)免疫原的免疫原性,及其诱导小鼠产生针对h PDGF-B的腹水抗体对人HepG2细胞增殖的抑制作用。本研究首先选择hPDGF-B的第103–118及152–167氨基酸序列作为抗原表位,构建p ET28-Trx-重组原核表达载体,表达并纯化获得6×his Trx-h PDGF-BΔ103-118及6×his Trx-h PDGF-BΔ152-167重组蛋白;然后使用纯化后的重组蛋白免疫小鼠,并给予腹腔注射H22肿瘤细胞制备腹水抗体,ELISA法检测抗体滴度,Western blotting法检测纯化腹水抗体与膜结合的PDGF-B结合能力;最后通过CCK8实验检测外源性PDGF-BB和两种纯化腹水抗体对肝癌Hep G2细胞增殖的作用。研究发现上述两种重组蛋白作为免疫原均可诱导小鼠产生高滴度的PDGF-B中和性抗体;两种h PDGF-B纯化腹水抗体能明显抑制PDGF-BB对肝癌Hep G2细胞增殖的促进作用。结果提示,Trx-PDGF-B重组蛋白作为免疫原有望为PDGF-B疫苗的制备提供新的方法,也为临床上肝癌的治疗提供了一种新的思路。
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