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目的：构建GFP-Plk1同义突变表达载体及其稳定转染细胞系。方法：设计Polo样激酶1（Plk1）siRNA序列及相对应的同义突变引物，并利用二次PCR方法扩增Plk1基因，定向克隆到pRex-EGFP-IRES-Hygro载体中，构建pRex-EGFP-rPlk1-IRES-Hygro表达载体；利用逆转录病毒感染的方法，构建HeLa/GFP-rPlk1稳定细胞系；利用免疫印迹及激光共聚焦显微镜，验证Plk1 siRNA的干扰效果及稳定细胞系的构建。结果：双酶切鉴定和测序结果表明构建的pRex-EGFP