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目的 分析实时荧光聚合酶链式反应（PCR）法在高危型人乳头瘤病毒（HPV）检测中的应用价值。方法 选取2020年1月至12月在本院门诊就诊的200例疑似高危型HPV感染的患者作为研究对象，均采用PCR-反向点杂交法、杂交捕获Ⅱ代（HC-Ⅱ）法、实时荧光PCR法检测高危型HPV感染情况。以病理组织学检测结果为金标准，分析三种检测方法对高危型HPV的阳性检出率及诊断效能；比较三种检测方法对不同级别宫颈病变[慢性炎症、宫颈上皮内瘤变（CIN）、宫颈癌]高危型HPV的阳性检出率；比较不同宫颈病变组织的常见高危型HPV-DNA水平。结果 病理组织学检测结果显示，慢性炎症60例；CINⅠ级61例，Ⅱ级44例，Ⅲ级30例；宫颈鳞状细胞癌5例。高危型HPV感染检出率为71.00%（142/200），按照检出例数由多到少依次为HPV 16型53例、18型33例、31型16例、35型9例、39型6例、45型5例、33型4例、52型4例、51型3例、56型3例、68型3例、58型2例、59型1例。实时荧光PCR法检测高危型HPV的阳性检出率、灵敏度、特异度、准确度均高于PCR-反向点杂交法和HC-Ⅱ法，漏诊率、误诊率均低于PCR-反向点杂交法和HC-Ⅱ法（P＜0.05）。实时荧光PCR法与PCR-反向点杂交法、HC-Ⅱ法对不同级别宫颈病变高危型HPV的阳性检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。宫颈癌患者的HPV 16、18型DNA平均拷贝数均高于CIN患者（P＜0.05）。结论 实时荧光PCR法在高危型HPV检测中的应用价值显著，具有较高的检出率、灵敏度、特异度、准确度，值得临床推广应用。