【摘 要】
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目的 构建在亚太地区广泛流行的B基因型HBV可复制性克降,为该基因型相关研究奠定基础.方法 采用分子克隆的方法在体外分别扩增HBV基因组的相应片段,并进行连接,构建含1.3倍HB
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,430030
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目的 构建在亚太地区广泛流行的B基因型HBV可复制性克降,为该基因型相关研究奠定基础.方法 采用分子克隆的方法在体外分别扩增HBV基因组的相应片段,并进行连接,构建含1.3倍HBV基因组的可复制性克隆.体外转染Huh7细胞系以评价其抗原分泌和病毒复制的情况,使用高压尾静脉注射建立急性感染小鼠模型以评价体内病毒分泌情况以及肝内抗原表达的情况.结果 所构建的克隆体外转染Huh7细胞后可分泌高浓度的HBsAg和HBeAg,并可以检测到明显的转录子和复制中间体.高压尾静脉注射小鼠后肝组织内可检测到HBcAg表达,血清中可以检测到HBV DNA,其水平随时间发生动态变化.结论 所构建的克隆在体外及体内均可进行复制,具有良好的复制能力.
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