评价自噬在低氧预处理骨髓间充质干细胞(BMSC)在大鼠脊髓缺血再灌注损伤组织中存活的作用。

离体实验　大鼠原代BMSC，以1×10⁶个/ml密度接种于12孔板(1 ml/孔)，采用随机数字表法，将其分为6组(n＝30)：对照组(C组)、常氧培养组(N组)、低氧预处理组(H组)、低氧预处理＋腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂复合物C组(HC组)、低氧预处理＋自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(HM组)和低氧预处理＋哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂雷帕霉素组(HR组)。低氧预处理前3 h时HC组、HM组和HR组分别加入10 mmol/L复合物C、5 mmol/L 3-甲基腺嘌呤和10 nmol/L雷帕霉素。每组取12个培养孔，测定磷酸化AMPK(p-AMPK)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、微管相关蛋白1轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)表达。每组取18个培养孔，加入500 μmmol/L H₂O₂孵育24 h，检测细胞存活率、凋亡率、caspase-9和caspase-3的活性。在体实验　成年雄性SD大鼠，体重300～350 g，3月龄，脊髓缺血再灌注损伤模型制备成功的大鼠192只，采用随机数字表法，将其分为6组(n＝32)C组、N组、H组、HC组、HM组和MR组，于再灌注30 min时，于L_1-5脊髓节段分别注射离体实验中相应各组处理的1×10⁶个/ml BMSC悬液。分别于再灌注4、12、24和48 h时进行神经行为学评分，取脊髓组织，测定凋亡BMSC情况。

离体实验　与N组比较，H组p-AMPK表达上调，p-mTOR表达下调，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和存活率升高，凋亡率、caspase-9和caspase-3的活性降低(P<0.05)；与H组比较，HC组p-AMPK表达下调，p-mTOR表达上调，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和存活率降低，凋亡率、caspase-9和caspase-3的活性升高，HM组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和存活率降低，凋亡率、caspase-9和caspase-3的活性升高，HR组p-mTOR表达下调，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和存活率升高，凋亡率、caspase-9和caspase-3的活性降低(P<0.05)。在体实验　与N组比较，H组神经行为学评分升高，脊髓凋亡BMSC计数降低(P<0.05)；与H组比较，HC组和HM组神经行为学评分降低，脊髓凋亡BMSC计数升高，HR组神经行为学评分升高，脊髓凋亡BMSC计数降低(P<0.05)。

自噬增强参与了低氧预处理BMSC在大鼠脊髓缺血再灌注损伤组织中存活，其机制与激活AMPK/mTOR通路有关。