【摘 要】
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目的研究miRNA-184(miR-184)在转化生长因子β2(transforming growth factor β2,TGF-β2)诱导人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化过程中的表达及意义。方法应用不同浓度(0μg·L-1
【基金项目】
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广西自然科学基金资助(编号:2015GXNSFAA139179);桂林市科学研究与技术开发计划项目资助(编号:20130120-4);广西医疗卫生适宜技术研究与开发项目资助(编号:S201407-08)~~
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目的研究miRNA-184(miR-184)在转化生长因子β2(transforming growth factor β2,TGF-β2)诱导人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化过程中的表达及意义。方法应用不同浓度(0μg·L-1、1μg·L-1、5μg·L-1、10μg·L-1、15μg·L-1)TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化,细胞免疫荧光和Western blot方法观察转分化相关分子波形蛋白(Vimentin)、钙黏附蛋白E(E-Cadherin)的表达;应用qRT-PCR检测miR-184在不同浓度(0μg·L-1、1μg·L-1、5μg·L-1、10μg·L-1、15μg·L-1)TGF-β2、不同作用时间(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h)TGF-β2(10μg·L-1)诱导人晶状体上皮细胞转分化中的表达变化。结果随着TGF-β2浓度的增加,细胞胞浆中Vimentin荧光强度增强;E-Cadherin蛋白表达逐渐减少,各组细胞间E-Cadherin表达量差异有统计学意义(F=87.617,P<0.01);Vimentin蛋白表达逐渐增加,各组细胞间Vimentin表达量差异有统计学意义(F=68.923,P<0.01)。随着TGF-β2浓度的增加,细胞中miR-184相对表达量增多,在10μg·L-1 TGF-β2诱导组达到峰值;随着TGF-β2诱导时间的延长,细胞中miR-184相对表达量增加,在24 h表达达到峰值。结论 TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化时细胞内miR-184表达增加,并与诱导浓度和时间有关,为进一步研究miR-184在人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化中的作用及机制提供实验基础。
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