【摘 要】
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目的 构建luxS基因的同源重组克隆载体以备将来进行luxS基因同源重组knockout突变株的研究。方法 利用高保真的pmDNA聚合酶,通过嵌套式PCR的方法,分别扩增出变形链球菌luxS基因
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔内科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30400497);上海市科委重点科研基金资助项目(04JC14066)
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目的 构建luxS基因的同源重组克隆载体以备将来进行luxS基因同源重组knockout突变株的研究。方法 利用高保真的pmDNA聚合酶,通过嵌套式PCR的方法,分别扩增出变形链球菌luxS基因的上下游片段(Xup,Xdn)以及大肠杆菌pH1+质粒的卡那霉素抗性基因片段(Kana),依次采用相应的双酶切反应将这些片段连接入噬菌体载体pBluescript RSK(+)Phagemids,以构建目的质粒Xukd-pbsk重组载体。结果 经酶切鉴定目的质粒各片段插入无误,插入片段的测序报告也显示碱基无错配,含
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