【摘 要】
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目的 探讨蛋白酶激活受体2(protease activated receptor 2,PAR2)对肝癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 RT-qPCR检测100例肝癌组织及相应的癌旁组织中PAR2 mRNA的表达,并分析肝癌
【机 构】
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400014 重庆,重庆市急救医疗中心检验科;
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目的 探讨蛋白酶激活受体2(protease activated receptor 2,PAR2)对肝癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 RT-qPCR检测100例肝癌组织及相应的癌旁组织中PAR2 mRNA的表达,并分析肝癌患者临床病理参数与PAR2表达水平之间的相关性.RT-qPCR及Weste blot检测原代肝细胞、永生化肝细胞及肝癌细胞中PAR2 mRNA及蛋白的表达.采用siRNA靶向沉默PAR2的表达,MTS法及软琼脂集落形成实验检测沉默PAR2对肝癌细胞增殖的影响,流式细胞术及PARP的剪切检测沉默PAR2对肝癌细胞凋亡的影响.RT-qPCR筛选PAR2调控的凋亡靶基因,并用Weste blot进行验证.结果肝癌组织中PAR2 mRNA的相对表达量为(1.86±1.26),明显高于癌旁组织(0.96±0.66,P<0.001),且PAR2在肝癌组织中表达上调与肿瘤的长径以及分期均相关(P=0.002).PAR2在肝癌细胞中的表达高于永生化肝细胞和原代肝细胞(P<0.05).沉默PAR2抑制肝癌细胞SK-Hep-1和PLC/PRF/5的活性(P<0.01)及集落形成能力(P<0.01),沉默PAR2导致SK-Hep-1和PLC/PRF/5细胞凋亡比例分别增加109％(P<0.01)和112％(P<0.01);且沉默PAR2增加了Bax mRNA和蛋白表达水平.结论PAR2可通过影响Bax的表达而影响肝癌细胞的增殖与凋亡.
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