【摘 要】
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目的 探讨在肝细胞炎性损伤模型中自噬激动剂LYN-1604对肝细胞L02的保护作用.方法 体外培养人正常肝L02细胞,由肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和D-氨基半乳糖(d-galactosamine,D-Gal)诱导肝细胞炎性损伤细胞模型.实验分为5组,即正常组、肝细胞炎性损伤模型组(模型组)、低剂量LYN-1604组、中剂量LYN-1604组和高剂量LYN-1604组.CCK8法测定不同浓度梯度LYN-1604对正常L02细胞活性的影响.Western b
【机 构】
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430060 武汉大学人民医院感染科
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目的 探讨在肝细胞炎性损伤模型中自噬激动剂LYN-1604对肝细胞L02的保护作用.方法 体外培养人正常肝L02细胞,由肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和D-氨基半乳糖(d-galactosamine,D-Gal)诱导肝细胞炎性损伤细胞模型.实验分为5组,即正常组、肝细胞炎性损伤模型组(模型组)、低剂量LYN-1604组、中剂量LYN-1604组和高剂量LYN-1604组.CCK8法测定不同浓度梯度LYN-1604对正常L02细胞活性的影响.Western blot法检测UNC-51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK1)相对含量,酶联免疫吸附测定法检测细胞培养物上清的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量,免联免疫吸附法及免疫荧光法检测细胞内苹果酸脱氢酶1(malate dehydrogenase 1,MDH1)含量.结果 在LYN-1604浓度≤10μmol/L时,药物对L02细胞活性无显著影响.LYN-1604在肝细胞炎性损伤细胞模型中能通过激活ULK1,降低细胞培养物上清中的LDH含量,提高细胞内MDH1的水平,且作用在一定范围内随药物剂量的增大而增强.结论 LYN-1604在肝细胞炎性损伤细胞模型中能通过激活ULK1,降低细胞培养物上清中的LDH含量,提高细胞内MDH1的水平.其保护肝细胞的机制可能是通过激活ULK1促进线粒体自噬从而改善细胞能量代谢来实现的.
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