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细菌感染性疾病的发病率呈上升趋势,并且严重感染患者治疗延迟与死亡率升高密切相关[1-3].快速、准确检测致病菌是治疗和预防感染性疾病的关键.传统的细菌培养联合药物敏感试验检测周期长,灵敏度有限。
NASBA技术在致病菌检测中的应用
【摘 要】
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细菌感染性疾病的发病率呈上升趋势,并且严重感染患者治疗延迟与死亡率升高密切相关[1-3].快速、准确检测致病菌是治疗和预防感染性疾病的关键.传统的细菌培养联合药物敏感试验检测周期长,灵敏度有限。
【机 构】
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315211宁波大学医学院,315010宁波市第二医院急诊科,315010宁波市第二医院干细胞实验室
【出 处】
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中华微生物学和免疫学杂志
【发表日期】
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2013年33期
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrixassisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)是近年来发展起来的一种新型软电离质谱技术,现今其在微生物快速检测方面的应用得到广泛关注.相对于微生物实验室现有的传统鉴定方法和分子生物学方法,MALDITOF MS具有快速、准确、灵敏、分
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IgG4相关性疾病又称为IgG4阳性多器官淋巴细胞增生综合征,是一种与IgG4相关,IgG4阳性浆细胞大量增生性浸润而导致多器官和组织硬化和纤维化的慢性系统性自身免疫性疾病.该病以肿瘤样增生、席纹状纤维化、大量IgG4阳性浆细胞浸润、血清IgG4水平显著升高为特征,其病理生理学机制复杂,尤其是IgG4分子具有的独特生物学特点,在参与IgG4相关性疾病中的炎症免疫中发挥着重要作用.近年来,随着人们对
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目的 建立一个稳定有效的大鼠皮肤感染模型,用于评价外用抗感染药物的疗效.方法 成年SD大鼠皮下注射环磷酰胺建立稳定的免疫功能抑制状态后,在其背部行手术造创口,连续2d涂擦耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌液.肉眼观察伤口动态感染情况、伤口组织病理表现及伤口痊愈时间3项指标,作为判断建立皮肤感染模型的依据.结果 人工感染的实验大鼠皮肤伤口出现典型化脓性感染,其中环磷酰胺处理组比未处理组大鼠的伤口感染情况和病
目的 摸索建立脑心肌炎病毒(EMCV)鉴定方法.方法 根据GenBank中EMCVVR-129B序列设计引物,提取病毒RNA,进行RT-PCR,琼脂糖凝胶电泳检测片段大小.将DNA测序结果与GenBank中相同毒株EMCV序列进行比对.以RK细胞培养的全病毒作为免疫原制备抗血清,用于建立间接免疫荧光试验(IIFA)及中和试验方法,并验证方法精密性和特异性.制备抗GST-VP1和抗GST-VP2多克
目的 原核表达并纯化登革病毒3型(DENV-3)E蛋白,并用于制备其抗体.方法 采用PCR技术克隆DENV-3 E蛋白基因,插入原核表达质粒载体pET-32a(+),转化大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导表达.表达产物经纯化后,免疫家兔,制备DENV-3 E蛋白抗血清,并用于Westernblot鉴定.同时,采用ELISA测定其抗体效价,并初步应用于DENV-3的检测.结果 重组表达载
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)发现于1989年[1],目前全球约1.7亿人感染,占世界人口总数的3％,大多数的急性感染者会发展为慢性肝炎并与肝硬化和肝癌的发生密切相关[2].自HCV发现之后近20年的时间里,由于缺乏理想可靠的细胞及动物培养模型,人们在HCV生活周期、致病与免疫保护、抗病毒治疗药物的研发等方面的研究进展非常迟缓。
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疏螺旋体属包括多个人类的致病菌，如引起莱姆病的伯氏疏螺旋体（Bor-relia burgdorfreri）。疏螺旋体的基因组结构特殊，包括染色体和约20个大小不等的质粒。一些质粒在传代培养过程容易丢失，然而却是维持病原菌感染性所必需的。疏螺旋体的单菌落分离及纯培养不能按照常规的微生物学方法进行，
随着各种医疗侵袭性操作日益增多,细菌生物被膜感染占医院内细菌感染的比例逐年上升,且后果十分严重.其中葡萄球菌是最常见的病原菌.近些年的研究认为,细菌细胞死亡和溶解对细菌生物被膜的形成和发展有重要作用.目前已知的对细菌死亡和溶解的调节机制复杂而多样.其中,与真核细胞凋亡之间具有高度相似性的Cid/Lrg调节系统是近年来的研究热点.本文主要就Cid/Lrg调节系统在葡萄球菌生物被膜形成和发展中的作用和
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目的 研究新型合成的含噻唑烷4-酮环的免疫调节剂CHla对人类iNKT（invariantnaturekillerT）细胞功能的影响。方法从健康人外周血分离单个核淋巴细胞（PBMC），经α-Galeer和IL-2体外刺激扩增后利用iNKT分离试剂盒经磁珠分选（MACS）得到纯化的iNKT细胞。采用MTT法定量测定CHla对iNKT细胞增殖的影响，利用^51Cr释放实验观察iNKT细胞对K562细胞
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目的 利用杆状病毒表达系统共表达狂犬病病毒CTN-1V株核蛋白(nucleoprotein,NP)及糖蛋白(glycoprotein,GP).方法 RT-PCR分别扩增CTN-1V株病毒GP、NP编码区基因,分别依次克隆入转移质粒pFastBacDual的PP10区及PPH区构建杆状病毒重组转移质粒P-NG,转化DH10Bac E.coli感受态细胞获得重组穿梭质粒A-NG,转染Sf9细胞获得重组