【摘 要】
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目的:建立永生化的淋巴细胞系(LCLs)细胞系,为EB病毒的致瘤机制研究做出初步探索。方法:收集含EB病毒上清液,并刺激转化正常受试者外周血中提取的单个核细胞(PBMC),观察LCLs
【机 构】
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广州医学院附属肿瘤医院,广东省人民医院肺癌研究所
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目的:建立永生化的淋巴细胞系(LCLs)细胞系,为EB病毒的致瘤机制研究做出初步探索。方法:收集含EB病毒上清液,并刺激转化正常受试者外周血中提取的单个核细胞(PBMC),观察LCLs细胞转化生成过程中细胞形态学及其细胞数量等的变化,通过评价细胞通过危机期并传代达30次以上确认建立永生化的LCLs细胞系。结果:15例受试者外周血进行EB病毒刺激感染,其中12例在形成LCLs后14d左右出现细胞贴壁,空泡形成老化逐渐死亡而停留在LCLs细胞永生化前期未能成系,3例标本在B细胞母细胞化形成LCLs后越过此危机期(crisis)逐渐细胞克隆数增加成集落增长并成细胞系,LCL建系成功率约为20%。结论:EB病毒转化生成人BLCLs存在两个关键阶段,即LCLs形成(LCLs永生化前期)和LCLs永生化。永生化LCLs细胞系建立存在一定的成功率,提示需要病毒转化以外的遗传学变异才能达永生化状态,具体机制值得进一步研究。
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