【摘 要】
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为了评估一种快速简单用以确定海洋微藻细胞活性的技术,针对船舶压载水中常见的3个门类中11种10～50μm单细胞微藻用中性红(NR)、5-氯甲基荧光素二乙酸酯(CMFDA)、荧光素二乙酸
【机 构】
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海洋活性物质与现代分析技术国家海洋局重点实验室,国家海洋局第一海洋研究所,河北海事局,中国海洋大学海洋生命学院,青岛海洋科学与技术国家实验室海洋生态与环境科学功能实验室
【基金项目】
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国家重点研发计划项目——我国近海典型外来生物入侵灾害风险防控技术和装备研发(2017YFC1404604);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目——微塑料对海洋硅藻光合作用的影响及分子机制初探(2017Q09);国家自然科学基金委员会-山东省人民政府海洋科学研究中心联合基金项目——海洋生态与环境科学(U1606404);国家自然科学基金项目——海洋玫瑰杆菌群体感应及其退出机制对藻
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为了评估一种快速简单用以确定海洋微藻细胞活性的技术,针对船舶压载水中常见的3个门类中11种10～50μm单细胞微藻用中性红(NR)、5-氯甲基荧光素二乙酸酯(CMFDA)、荧光素二乙酸酯(FDA)三种染料进行染色,通过光镜和荧光显微镜对染色结果进行测定。结果表明,NR(中性红)是检测本实验中全部海洋微藻藻株细胞活性的最佳染料,染色最佳浓度为1/10 000,染色时间为30min;5-氯甲基荧光素二乙酸酯(CMFDA)、荧光素二乙酸酯(FDA)和双荧光染色对海洋微藻藻株活细胞着色时间短,染色效果明显,但其应用具有局限性,适用于检测本实验中甲藻门(塔玛亚历山大藻、链状亚历山大藻、微小原甲藻、利玛原甲藻、东海原甲藻、米氏凯伦藻)和绿藻门(青岛大扁藻和杜氏盐藻)的活性,染色最佳浓度为5μmol/L FDA+2.5μmol/L CMFDA,染色时间为10min,但不适用于检测硅藻门的细胞活性。因此,中性红更适合检测船舶压载水中微藻活细胞,根据光镜下微藻细胞着色情况而判断细胞活性。
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