【摘 要】
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目的研究旋毛虫5′-nucleotidase基因的序列结构特征及其蛋白克隆表达。方法从旋毛虫获得5′-nucleotidase基因的序列,利用生物信息学方法进行系统性分析,并进行原核表达。结
【机 构】
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河南科技大学动物科技学院洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室; 吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室; 河南科技大学医学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(No.31572489);河南科技大学博士启动基金项目(No.13480071);河南省高等学校重点科研项目计划(No.17A230009);河南省科技攻关项目(No.182102110061)联合资助~~
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目的研究旋毛虫5′-nucleotidase基因的序列结构特征及其蛋白克隆表达。方法从旋毛虫获得5′-nucleotidase基因的序列,利用生物信息学方法进行系统性分析,并进行原核表达。结果旋毛虫5′-nucleotidase基因大小为1 653bp,编码550个氨基酸,119个氨基酸残基组成,理论相对分子质量(Mr)为62kD,分子式为C2800H4358N742O803S23,等电点为6.13,属于稳定存在的亲水蛋白质。该蛋白含有21个氨基酸组成的信号肽,同时具有跨膜区域,此外还含有3个N-糖基化位点、2个O-糖基化位点、20个磷酸化位点、28个B细胞线性结合位点和13个T细胞结合位点。二级结构中,α-螺旋占43.27%(238个),伸展链占22.73%(125个),β-折叠占7.82%(43个),无规则卷曲占26.18%(144个)。SDS-PAGE显示,5′-nucleotidase基因在原核表达系统中呈可溶性形式表达,重组蛋白大小约为74kD。结论成功克隆了旋毛虫5′-nucleotidase基因,对其进行序列分析和原核表达,为进一步探究5′-nucleotidase蛋白在旋毛虫感染过程中的作用奠定基础。
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