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目的：建立HPLC-ESI/TOF-MS法分析穿琥宁注射液中未知降解产物。方法：采用 Agilent1200 DAD/TOF-MS液质联用仪，采用Inertsil ODS-3色谱柱，以甲醇-0.2％甲酸溶液为流动相；质谱检测器采用ESI离子源，在正、负离子模式下采集数据，分析降解产物结构信息。结果：发现穿琥宁注射液中有两个主要降解产物且互为同分异构体，并通过色谱分离得到相应的单体化合物，最后根据电喷雾质谱正、负离子模式下得到的准分子离子峰信息，并结合红外光谱、核磁共振谱等波谱方法鉴定这两个降解产物分别为14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯-3-琥珀酸单酯和14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯-19-琥珀酸单酯。结论：按本文确定的方法，可以检测出穿琥宁注射液中的两个主要降解产物。