【摘 要】
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以H9N2亚型禽流感病毒（avian influenza virus， AIV）为研究对象，将病毒灭活纯化后免疫羊驼，测得其血清抗体效价为1∶128 000；提取羊驼外周血淋巴细胞RNA，获得单个重链可变区（variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody， VHH）基因，成功构建H9N2亚型AIV的纳米抗体噬菌体展示文库，文库库容量为1
【基金项目】
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国家“十四五”重点研发计划项目（2022YFD1801003）； 中央引导地方科技发展资金项目（23ZYQA295）； 甘肃省科技重大专项计划项目（21ZD3NA001-13）； 甘肃省陇原青年创新创业人才项目（202204190202）；
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以H9N2亚型禽流感病毒（avian influenza virus， AIV）为研究对象，将病毒灭活纯化后免疫羊驼，测得其血清抗体效价为1∶128 000；提取羊驼外周血淋巴细胞RNA，获得单个重链可变区（variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody， VHH）基因，成功构建H9N2亚型AIV的纳米抗体噬菌体展示文库，文库库容量为1.3×109 cfu/mL，阳性率为100%；以H9N2亚型AIV-NP蛋白为靶向抗原，利用噬菌体展示技术进行筛选，获得3株靶向H9N2亚型AIV-NP蛋白的纳米抗体；构建纳米抗体真核表达重组质粒，表达纯化后收获3株纳米抗体；通过间接ELISA、Western-blot、间接免疫荧光试验对纳米抗体的亲和力、特异性等生物活性进行鉴定，最终得到1株广谱性高亲和力的H9N2亚型AIV-NP蛋白纳米抗体，可为检测方法的建立提供新的生物材料。
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