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目的
研究选择性环氧合酶-2 (cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂NS-398和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)联合对胆管癌细胞QBC939凋亡的影响及机制。
方法体外培养胆管癌QBC939细胞,设立NS-398组、DHA组、联合组和空白组,将0,25,50,100,150,200 μmol/L的NS-398和0,15,30,45,60,75 μg/ml的DHA分别联合作用于QBC939细胞;应用CCK8法检测QBC939细胞的生长抑制率;采用流式细胞术检测细胞凋亡;应用实时荧光定量PCR、Western blot和ELISA检测细胞中β-catenin和c-myc的表达。
结果NS-398和DHA在体外均能抑制QBC939细胞生长,NS-398为100 μmol/L联合DHA为45 μg/ml作用后,细胞生长抑制率达90%(F=5.85,P<0.05),二者联合能明显促进QBC939细胞凋亡(F=8.16,P<0.01)。实时荧光定量PCR、Western blot和ELISA实验均显示联合能明显抑制β-catenin (F=7.61,P<0.01)、(F=7.75, P<0.01)、(F=8.17, P<0.01)和c-myc (F=7.92,P<0.01)、(F=8.76,P<0.01)、(F=8.12,P<0.01)表达。
结论NS-398和DHA联合能明显抑制QBC939细胞生长,促进早期凋亡,二者联合对QBC939细胞生长的抑制作用可能是通过抑制β-catenin和c-myc的表达,促进细胞早期凋亡。