【摘 要】
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目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(core)与NS4B融合表达克隆,并在大肠埃希菌中表达。方法:应用PCR方法从抗HCV阳性血清中扩增出HCV核心蛋白基因和NS4B基因的c DNA片段,将两部分
【机 构】
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江苏大学附属人民医院检验科,南京诺尔曼生物技术有限公司
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目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(core)与NS4B融合表达克隆,并在大肠埃希菌中表达。方法:应用PCR方法从抗HCV阳性血清中扩增出HCV核心蛋白基因和NS4B基因的c DNA片段,将两部分基因片段拼接成一条完整c DNA,连接到表达载体p ET28a上,菌落PCR和测序方法选择阳性核心蛋白-NS4B-p ET28a重组质粒。将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21中进行表达,分别用SDS-PAGE和蛋白质印迹分析表达的重组融合蛋白。结果:琼脂糖凝胶电泳结果显示,成功获得核心蛋白基因和NS4B基
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