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目的
构建MicroRNA-126慢病毒载体以及研究MicroRNA-126对缺血条件下间充质干细胞存活和成骨分化的影响。
方法构建MicroRNA-126慢病毒载体并感染间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs);流式检测转染能力和MSC合成I型胶原能力;ELISA检测细胞培养上清中骨钙素、胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor 1, IGF-1)和转化生长因子β(Transforming growth factor-β,TGF-β)的含量;构建下颌骨骨缺损模型,在体内注射混合有MSCs的水凝胶,移植48 h,检测存活率和分化为成骨细胞的比率。
结果流式的结果显示MicroRNA-126的慢病毒载体能顺利的转染进入细胞;ELISA的结果显示MicroRNA-126的慢病毒载体转染的MSC能分泌更多的骨钙素、IGF-1和TGF-β,相对于对照病毒处理组分别上升了1.43、1.87和2.63倍(P<0.05);动物实验的结果显示移植48h后,MicroRNA-126组存活的干细胞的数量是对照病毒组的4.56倍,分化为成骨细胞的MSC的比例为75%,是对照病毒组的3.95倍(P<0.05)。
结论MicroRNA-126可以维持缺血条件下间充质干细胞存活及其向成骨细胞的分化。