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目的
制备携带脑源性神经营养因子基因(BDNF)的聚氰基丙烯酸正丁酯(PBCA)纳米粒并在活体颅脑损伤大鼠脑内表达，观察PBCA纳米粒是否具有提高BDNF基因转染率的能力。
方法选用乳化聚合法制备PBCA纳米粒，以透射电子显微镜分析纳米粒的形态和粒径。构建真核表达载体PEGFP-BDNF，经过酶切鉴定及测序后利用PBCA纳米粒进行包裹。选用48只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白组、PBCA组、PEGFP-BDNF组、PBCA-PEGFP-BDNF组，每组12只，按照自由落体致伤原理制备颅脑损伤大鼠模型并分别注入生理盐水、PBCA纳米粒、质粒PEGFP-BDNF、PBCA-PEGFP-BDNF各1 mL。7 d后取大鼠右侧大脑创伤周围脑组织，经荧光显微镜，RT-PCR及Western blotting检测BDNF mRNA及蛋白在大鼠脑组织中的表达情况。
结果所制PBCA纳米粒粒径均匀、电动电位较高，负载率为(62.23±2.15) %。采用PBCA纳米粒包裹BDNF并转染大鼠后可见BDNF在模型大鼠脑内表达。RT-PCR结果提示，4组大鼠BDNF mRNA表达量差异有统计学意义(F=112.668，P=0.000)，与前3组比较，PBCA-PEGFP-BDNF组BDNF mRNA表达量明显升高，差异有统计学意义(P< 0.05)。Western blotting结果提示，4组大鼠BDNF差异有统计学意义(F=66.629，P= 0.000)，PEGFP-BDNF组中BDNF蛋白的表达明显高于空白组和PBCA组，而PBCA-PEGFP-BDNF组中BDNF的表达明显高于前3组，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论PBCA纳米粒是一种良好的基因载体，可携带基因进入组织高效表达。