探讨猪链球菌2型三磷酸腺苷结合蛋白转运蛋白转运蛋白SSU05_0948突变株的致病性,为了解猪链球菌逃避宿主天然免疫提供线索。
方法根据同源重组技术构建SSU05_0948突变株05ZYH33Δ0948;通过细菌黏附、全血杀伤、小鼠脑膜炎实验、小鼠和仔猪攻毒实验全面评价突变株和野生株在致病性方面的差异。统计学分析采用卡方检验和t检验。
结果成功构建了基因SSU05_0948的突变株05ZYH33Δ0948。黏附结果显示,野生株对A549的黏附率为(0.663±0.047)%,高于突变株的(0.246±0.074)%,比较差异有统计学意义(χ2=5.267,P=0.014);野生株对Hep2的黏附率为(16.540±2.320)%,高于突变株的(1.970±0.320)%,比较差异有统计学意义(χ2=0.014,P<0.01);野生株对HBMEC的黏附率为(5.497±0.174)%,高于突变株的(1.950±0.335)%,比较差异有统计学意义(χ2=0.016,P<0.01)。野生株在全血中的杀伤率为(32.970±3.589)%,突变株在全血中的杀伤率为(29.560±3.740)%,比较差异无统计学意义(χ2=1.200,P=0.133)。仔猪竞争感染实验显示,12 h竞争感染指数为0.046±0.003,24 h竞争感染指数为0.107±0.003,36 h竞争感染指数为0.064±0.001,12 h和24 h比较差异有统计学意义(t=15.490,P=0.041),24 h和36 h比较差异有统计学意义(t=5.660,P=0.047),2 h和36 h比较差异无统计学意义(t= 1.445,P=0.285)。
结论猪链球菌2型ABC转运蛋白SSU05_0948是新发现的黏附因子和毒力因子,是引起脑膜炎的新致病因子,在猪链球菌抗宿主天然免疫中发挥重要作用。