【摘 要】
：
为了敲除山羊乳中致敏源β-乳球蛋白(BLG)基因,同时在BLG基因座定点整合人乳铁蛋白(hLF)基因。首先针对山羊BLG第3外显子识别位点设计了1对特异性TALEN-3-L/R质粒对;同时,构
【机 构】
：
扬州大学兽医学院江苏省转基因动物制药工程研究中心; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;
【基金项目】
：
国家转基因生物新品种培育重大专项(No.2011ZX08008-004);江苏高校优势学科建设工程资助项目;扬州大学研究生科研创新计划项目(No.CXLX-1435)资助~~
论文部分内容阅读
为了敲除山羊乳中致敏源β-乳球蛋白(BLG)基因,同时在BLG基因座定点整合人乳铁蛋白(hLF)基因。首先针对山羊BLG第3外显子识别位点设计了1对特异性TALEN-3-L/R质粒对;同时,构建了含有1个HSV-TK负筛选基因的hLF基因打靶载体BLC14-TK。TALENs质粒对转染山羊胎儿成纤维细胞,2μg/m L嘌呤霉素筛选3 d,PCR扩增产物测序来验证其切割DNA活性。打靶载体BLC14-TK与TALEN-3-L/R质粒对共转染山羊胎儿成纤维细胞,经700μg/m L G418和2μg/m L GCV共筛选药物抗性细胞株;通过整合检测和同源重组检测来筛选hLF基因打靶细胞株;BLG~–/hLF~+打靶细胞株作为供核细胞进行山羊体细胞核移植。结果为:TALEN-3-L/R致突变率为25%-30%;获得BLG~–/hLF~+打靶细胞6株;共制作重构胚胎335枚,移植受体山羊23只,B超检测到30-35 d的妊娠受体9只(妊娠率39.1%),其中1只50日龄克隆胎儿验证为BLG~–/hLF~+基因型。以上结果表明获得BLG基因座定点整合hLF基因的基因打靶山羊是可行的,为培育羊乳中含低致敏原和富含hLF的山羊新品系奠定了基础。
其他文献
目的:探索HGF/c-met传导通路抑制剂SU11274抑制子宫内膜癌细胞增殖的分子机制。方法:使用不同浓度SU11274(0.5μmol/L、1.0μmol/L、1.5μmol/L)作用ishikawa和HEC-1B两种细
目的:分析急诊科室施行急救流程改进后效果。方法:选取我院急诊科室中15名护理人员作为研究对象,分析急诊科室施行急诊流程改进后效果。结果:在改进施行急诊流程后,抢救室抢
识字教学是小学语文教学的重要组成部分,识字是学生学习其他知识的基础,是学生有效开展后续学习的保障。小学语文教师要采取有效方法强化识字教学,增强识字教学效果,为学生的
在经济快速发展的时期,市场经济不断变化,企业面临着一定的机遇与挑战,在这种情况下企业只有抓住机遇积极应对挑战才能保证企业的可持续发展。因此企业要对自身有全面的认识,
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)ATB联合基质金属蛋白酶-1(MMP-1)与血清淀粉样蛋白A(SAA)对食管癌的诊断价值,及三者与食管癌临床病理特征的关系。方法收集食管癌患者135例,与
如何经济有效地开发已探明未动用的难采储量,是以开采油气资源为主要经济来源的国家共同面临的一个难题。
How to develop economically and effectively proven reserves t
目的：探讨完善后的护理流程对急诊患者抢救效率的影响。方法：将实施完善后急诊流程的82例急诊患者作为观察组，实施常规急诊护理流程的84例患者作为对照组，比较两组患者的抢救效率
本文分析了融合创新时代广电网络所处的内、外部环境及其带来的机遇与挑战，提出了“创新驱动、资源整合、产业延伸、开放共享”的总体发展思路，及“舆论宣传主阵地、综合信息服
针对发电企业烟气脱硝催化剂工程管理经验较为缺乏的现状,设计开发了燃煤机组SCR脱硝催化剂性能评价分析与寿命预测管理系统.该系统构建了催化剂性能信息数据库,可存储多个机
贵刊2011年第3期杂志《验光师之家》栏目刊登了《关于双眼平衡的探讨》的讨论话题,这个话题非常好,希望以后《验光师之家》栏目多讨论一些类似的话题,让大家各抒己见,把自己