【摘 要】
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利用超速离心、饱和硫酸铵、聚乙二醇-6000(PEG-6000)对猪传染性胃肠炎细胞毒进行纯化,收集纯化病毒测定蛋白含量,分别运用PCR方法和作为ELISA包被抗原方法对纯化的效果进行
【机 构】
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上海市农业科学院畜牧兽医研究所,南昌大学医学院
【基金项目】
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江西省自然科学基金项目(2007GZY1003)
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利用超速离心、饱和硫酸铵、聚乙二醇-6000(PEG-6000)对猪传染性胃肠炎细胞毒进行纯化,收集纯化病毒测定蛋白含量,分别运用PCR方法和作为ELISA包被抗原方法对纯化的效果进行检测,并对最佳纯化方法进行优化。3种纯化方法获得的蛋白浓度分别为1.875、6.435、0.763 mg/mL。PCR检测结果显示PEG-6000纯化后在上清液中未检出病毒,其余2种上清中均检出病毒。3种纯化方法制备的包被抗原ELISA试验阴阳性比值(P/N)分别为2.21、1.27、2.25,最终选择PEG-6000作为纯化病毒的方法,其最佳优化参数为PEG-6000浓度8%、浓缩时间2 h、NaCl浓度1%。研究表明利用PEG-6000纯化TGEV是一种经济实用、操作简单、并有较高纯化效率的方法,纯化后的TGEV为后续建立特异、敏感、快速的ELISA检测方法奠定了良好基础。
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