TAIL—PCR方法快速分离Xcc致病相关基因序列

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以mini-Tn5gfp-km转座子中nptII片段作为探针,对已获得的五株野油菜黄单胞菌野油菜黑腐病致病型(Xcc)非致病突变体进行了Southern blot分析,结果表明,这五株突变体确由mini-Tn5~km转座子插入致病相关基因所致,且为单拷贝不同位点的插入.提取这五株突变体总DNA作为模板,采用改进的热不对称交错PCR(TAIL-PCR)方法从其中克隆到了各自转座子插入区侧翼序列,对这些侧翼序列进行了序列测定并将分析结果与GenBankdatabase及Xcc全基因组序列做了比较,结果表明,五
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