抗人HAb18G分子单链抗体基因的构建及在大肠杆菌中的分泌表达

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目的:构建抗人HAbl8G分子单链抗体基因,并在大肠杆菌中进行分泌表达。方法:通过连接肽(G1y4Ser)3基因序列将已成功克隆的抗人肝癌单抗HAbl8轻、重链可变区基因拼接成单链抗体(ScFv)基因,并在5′和3′端引入相应的酶切位点,克隆至改造的分泌性表达载体pCANTAB 5His之中,转化到E.coli HB215l中进行诱导表达。亲和层析纯化表达蛋白后,以SDS-PAGE电泳、Western blot及ELISA等方法分析检测表达产物。结果:经限制性酶切鉴定及DNA测序分析,证实基因构建正确。S
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