重组融合饰胶蛋白拮抗转化生长因子β1刺激增生性瘢痕成纤维细胞增殖的作用

来源 :中华创伤杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chuai09
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目的观察重组谷胱甘肽S-转移酶与饰胶蛋白的融合蛋白(GST-Decorin)对转化生长因子β1刺激增生性瘢痕成纤维细胞的作用,探索瘢痕治疗的新方法。方法采用RT-PCR技术克隆饰胶蛋白(Decorin) cDNA并连接到pGEX-4T-1载体上,大肠杆菌内表达GST-Decorin;体外分离培养增生性瘢痕成纤维细胞,加入1∶6.25,1∶12.50,1∶25.00,1∶50.00,1∶100.00稀释度的GST-Decorin,经四唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖速度;进一步将2 mg/L的TGF-β1或同时与1∶12.50的GST-Decorin加入培养基内,比较细胞增殖速度的变化,并应用原位杂交及图像分析观察细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结果稀释度为1∶6.25~1∶25的GST-Decorin可有效地抑制瘢痕成纤维细胞的增殖速度(P<0.01或P<0.05);1∶12.50的GST-Decorin能完全拮抗2 mg/L的TGF-β1刺激细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原的mRNA表达。结论 GST-Decorin可抑制体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞增殖并拮抗TGF-β1,提示其具有潜在的治疗瘢痕增生的作用。

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