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为建立更为快速准确的苹果潜隐性病毒检测方法，以携带苹果茎沟病毒（ASGV）、苹果褪绿叶斑病毒（AcLsV）和苹果茎痘病毒（AsPV）的田间苹果成龄树为试材，设计合成了扩增目的片段为273bp（ASGV）、358bp（ACLSV）和432bp（ASPV）的3对特异性引物，并对影响RT-PCR体系的主要参数进行试验优化。结果表明：建立的一步多重RTPCR体系可以实现对3种主要潜隐性病毒的特异性检测；通过对田间多个样品的检测验证，表明该方法的准确性和灵敏度都很高，并缩短了单个样品的检测时间，极大地提高了工作效率