【摘 要】
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目的:构建TEM-1型β-内酰胺酶基因的表达栽体.方法:通过PCR扩增TEM-l全编码基因,将其连接入pBK-CMV载体中,并在大肠杆菌JM109中表达.采用琼脂二倍稀释法对TEM-1克隆菌株进行M
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目的:构建TEM-1型β-内酰胺酶基因的表达栽体.方法:通过PCR扩增TEM-l全编码基因,将其连接入pBK-CMV载体中,并在大肠杆菌JM109中表达.采用琼脂二倍稀释法对TEM-1克隆菌株进行MIC检测,双纸片法筛选及确证实验检测其表型,等电聚焦(IEF)电泳测定其等电点(pIs).结果:经酶切测序鉴定TEM-1基因的表达载体构建正确.重组菌产pI为5.4的TEM-1广谱酶,仅对青霉素类耐药.结论:TEM-1基因原核表达载体正确构建,为进一步研究打下了基础.
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