人G-CSF基因的克隆及其重组逆转录病毒载体的构建与初步应用

来源 :中国肿瘤生物治疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cwzhq

【摘要】

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利用RT-PCR方法克隆到包括有全部编码序列和部分5',3'端非编码序列的人G-CSF cDNA,并通过核苷酸测序得到证实。将其定向克隆至逆转录病毒载体pLXSN、构建成人G-CSF的

【作者】

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章卫平曹雪涛马施华黄欣张明徽陶群叶天星

【机构】

：

第二军医大学免疫学教研室上海200433

【出处】

：

中国肿瘤生物治疗杂志

【发表日期】

：

1996年1期

【关键词】

：

人G-CSF基因克隆重组逆转录病毒载体构建应用粒细胞集落刺激因子基因治疗 G - CSFretrovirusgene cloninggene tra

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利用RT-PCR方法克隆到包括有全部编码序列和部分5',3'端非编码序列的人G-CSF cDNA,并通过核苷酸测序得到证实。将其定向克隆至逆转录病毒载体pLXSN、构建成人G-CSF的重组逆转录病毒表达载体pLGSN。体外经CRE和CRIP细胞的两欹包装，病毒滴度达到了临床应用的水平(1.1×10^6CFU／m1)。hG-CSF逆转录病毒感染NIH3T3小鼠成纤维细胞后．分泌G-CSF达168U／m1．Southern分析表明hG-CSF基因己整合至NIH3T3-G-CSF细胞的

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