【摘 要】
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目的 本研究旨在构建并制备增强型荧光蛋白(EGFP)基因和Klotho基因重组腺病毒载体AdEGFP-Klotho,并将其感染HEK293细胞,为基因治疗提供研究基础。方法 设计含有NheⅠ与NotⅠ
【机 构】
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昆明医科大学附属延安医院心脏大血管外科/云南省心血管外科研究所,昆明医科大学附属延安医院老年医学科,中国人民解放军联勤保障部队第920医院干部病房
【基金项目】
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云南省基础研究计划(昆医联合专项)(2018FE001-276),云南省昆明市卫生科技人才培养千工程科研项目[2018SW(后备)06],昆明医科大学附属延安医院院内项目(yyky016-020)
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目的 本研究旨在构建并制备增强型荧光蛋白(EGFP)基因和Klotho基因重组腺病毒载体AdEGFP-Klotho,并将其感染HEK293细胞,为基因治疗提供研究基础。方法 设计含有NheⅠ与NotⅠ双酶切位点的引物,应用PCR方法扩增Klotho基因,将其连接到EGFP标记的pDC316-mCMV穿梭质粒上,构建重组穿梭质粒pDC316-mCMV-EGFP-Klotho,利用Polyfectin脂质体将骨架质粒和重组穿梭质粒共转染HEK293细胞进行同源重组,得到重组腺病毒Ad-EGFP-Klotho,
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