【摘 要】
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为弄清鸡含锰超氧化物歧化酶(manganese-containing superoxide dismutase,MnSOD)的cDNA序列,以开展动物锰营养学的深入研究,根据已知鸡MnSOD的N端氨基酸序列设计简并引物,应
【机 构】
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中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094西南农业大学,重庆,400716;
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为弄清鸡含锰超氧化物歧化酶(manganese-containing superoxide dismutase,MnSOD)的cDNA序列,以开展动物锰营养学的深入研究,根据已知鸡MnSOD的N端氨基酸序列设计简并引物,应用3＇RACE(rapid amptification of cDNA ends)技术,扩增克隆了鸡心肌MnSOD 990 bp的3＇cDNA片段.再根据3＇RACE片段测序结果设计引物进行5＇RACE,结果获取了一个与3＇RACE片段相互重叠的鸡心肌MnSOD 521 bp的5＇RACE片段,并对其进行了克隆测序.最后根据3＇RACE片段和5＇RACE片段序列信息进行拼接,从而获取鸡MnSOD cDNA的全序列信息.研究结果表明:鸡MnSOD cDNA全长为1 108个核苷酸,其中5＇非翻译区25个核苷酸,编码区675个核苷酸,3＇非翻译区408个核苷酸,编码一个长224个氨基酸残基的蛋白质前体.其中信号肽长26个氨基酸残基,成熟肽长198个氨基酸残基,分子量为22 kD.与人、大鼠、线虫、果蝇等真核生物MnSOD氨基酸序列的同源性分别为82.4%、84.7%、62.4%、59.3%.
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