赖型钩体内鞭毛基因的扩增、克隆、核苷酸序列测定及其在大肠杆菌中的表达

来源 :华西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yeluanwu
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根据钩体内鞭毛蛋白flaB基因核苷酸序列自行设计一对引物,以赖型钩体DNA为模板,用PCR扩增到约840bp的片段。扩增片段经酶切(Bam HI、Pst I)定向克隆入pUC8。重组质粒pLF1插入片段与哈勒焦型钩体flaβ基因相比,核苷酸序列和推测的氨基酸序列同源性很高。SDS-PAGE表明有一约33kd的特异蛋白带,表达量占菌体蛋白11%。免疫印迹试验表明此区带能被抗赖型钩体内鞭毛(轴丝)抗血
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