论文部分内容阅读
目的建立转移性胆囊癌细胞系,鉴定并研究其生物学特性。方法从人胆囊癌转移灶取材,将标本分离成单细胞悬液,用含15%胎牛血清的DMEM培养液进行原代和传代培养,培养成功后命名为EH-GB1细胞。电镜下观察EH—GB1细胞的形态,绘制细胞生长曲线。SCID小鼠皮下接种EH-GB1细胞,观察EH—GB1细胞的成瘤能力。采用免疫组化法,检测小鼠移植瘤组织中CA19-9的表达。分别用携带绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白报告基因(Red2)的慢病毒感染EH-GB1细胞,观察EH—GB1细胞表达GFP和Red2的情况。结果EH—GB1细胞体外连续传代20代以上,形态上具有典型的恶性上皮细胞特征,倍增时间约为24h。SCID小鼠皮下接种EH—GB1细胞后的成瘤率为100%。移植瘤细胞中CA19—9呈强阳性表达。EH—GB1细胞感染携带GFP或Red2基因的慢病毒后,可稳定地表达GFP和Red2。结论EH—GB1细胞有望成为首株来源于转移灶的稳定的人胆囊癌细胞系,转染并持续表达GFP和Red2的EH-GB1细胞是胆囊癌临床与基础研究中的理想实验模型。