【摘 要】
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目的：建立稳定表达乳腺癌耐药蛋白（Breastcancerresistanceprotein，BCRP）的小鼠成纤维细胞系PA317／BCRP，初步探讨其耐药机制。方法：从乳腺癌耐药细胞系MCF-7／ADR中克隆BCRP基因。将编
【机 构】
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乳腺癌防治教育部重点实验室天津市肿瘤防治重点实验室天津医科大学附属肿瘤医院淋巴瘤科
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目的：建立稳定表达乳腺癌耐药蛋白（Breastcancerresistanceprotein，BCRP）的小鼠成纤维细胞系PA317／BCRP，初步探讨其耐药机制。方法：从乳腺癌耐药细胞系MCF-7／ADR中克隆BCRP基因。将编码序列克隆导入真核表达载体pcDNA3．1，转化感受态E-ColiDH5α，获得重组质粒pcDNA3．1／BCRP，酶切并测序鉴定。用电穿孔法将质粒转染PA317细胞，同时转染pcDNA3．1／EGFP。G418筛选阳性克隆。阳性转染细胞提取细胞总RNA，RT—PCR检测BCRP
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