【摘 要】
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采用流加和降温培养工艺,实现在5 L搅拌式生物反应器规模的瞬时基因表达。首先比较了两种表达载体在CHO-S细胞中的瞬时基因表达,发现pID-mAAFP载体介导的瞬时转染表达可以获
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海富莼科芯生物技术有限公司
【基金项目】
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国家反应器重点实验室开放课题基金(2009ZX09503-013-2);国家科技重大专项(2009ZX09102-249)
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采用流加和降温培养工艺,实现在5 L搅拌式生物反应器规模的瞬时基因表达。首先比较了两种表达载体在CHO-S细胞中的瞬时基因表达,发现pID-mAAFP载体介导的瞬时转染表达可以获得mAAFP的高水平表达。采用pID-mAAFP载体在1.3 L搅拌式生物反应器中进行瞬时基因表达,与分批培养相比,通过流加和降温培养工艺对转染过程进行控制,培养时间延长1倍,蛋白表达浓度提高8倍。在5 L搅拌式生物反应器中对上述工艺进行成功放大,mAAFP质量浓度达到25 mg/L。之后,利用rProtein A Sepharo
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