探讨丁酸对SD大鼠肠黏膜屏障的作用情况,为防治坏死性小肠结肠炎等肠道疾病提供实验依据。
方法以生后7 d(P7)的SD新生鼠为实验对象,采用随机数字表法,选取实验组(12只)、生理盐水对照组(8只)和空白对照组(8只)大鼠。实验组给予丁酸,生理盐水对照组给予生理盐水,连续灌胃早晚各1次;空白对照组不做任何处理。10 d后取幼鼠近端结肠组织,利用尤氏灌注系统(Ussing Chamber)检测肠黏膜跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance,TER)值;Western Blot检测紧密连接蛋白ZO-1、Occludin及Claudin-1的表达情况;免疫组织化学法检测近端结肠组织ZO-1和Occludin的表达及分布情况(OD值)。
结果尤氏灌注系统发现丁酸组在0、30、60、90、120 min的TER值分别为(70.65±5.03)Ω·cm2、(72.40±5.58)Ω·cm2、(68.84±5.02)Ω·cm2、(64.64±4.64)Ω·cm2和(58.95±6.23)Ω·cm2,生理盐水对照组分别为(63.56±4.28)Ω·cm2、(59.31±4.07)Ω·cm2、(51.73±4.42)Ω·cm2、(45.28±5.18)Ω·cm2和(42.09±4.06)Ω·cm2,空白对照组分别为(59.99±4.21)Ω·cm2、(56.64±3.71)Ω·cm2、(51.53±4.00)Ω·cm2、(48.01±7.40)Ω·cm2和(45.41±10.00)Ω·cm2。丁酸组各时间点TER值与生理盐水对照组及空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.001);生理盐水对照组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。丁酸组紧密连接(TJ)蛋白Occludin及Claudin-1的表达(1.03±0.05、2.02±0.21)较生理盐水对照组(0.74±0.08、1.06±0.09)及空白对照组(0.73±0.05、1.04±0.06)增加,且组间比较,差异均有统计学意义(P<0.001);而生理盐水对照组与空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。组织学免疫组织化学检测发现丁酸组肠上皮细胞间ZO-1及Occludin的表达(0.22±0.04、0.26±0.04)较生理盐水对照组(0.16±0.02、0.21±0.02)及空白对照组明显增加(0.16±0.01、0.21±0.02),且组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而生理盐水对照组与空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。
结论在哺乳期肠黏膜屏障模型中,丁酸增加紧密连接蛋白的表达,能较快促进肠黏膜组织结构与功能发育成熟。