两种尘螨1类变应原嵌合基因的原核表达及生物活性鉴定

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:duokuo1
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目的原核表达尘螨1类变应原(粉尘螨1类变应原仇叩和户尘螨1类变应原Derpl基因)的嵌合基因R8,并检测其生物活性。方法以含嵌合基因R8的pUCm-T重组质粒为模板,用Derel的特异性引物进行PCR扩增,产物经酶切后与载体pET28a(+)连接,连接产物转入大肠埃希菌(E.coli)BL21感受态细胞,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后纯化,十二烷基磺酸钠.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS.PAGE)检测;纯化后的蛋白用ELISA检测其与粉尘螨过敏患者血清(IgE)的结合能力,同时以重组r
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