【摘 要】
：
目的通过定点突变,构建α干扰素-2bHis^58（IFNα-2bHis^58）,以期获得高效的新型药物分子。方法采用PCR体外定点突变技术,使α干扰素-2b基因的第58位密码子由GAA突变为CAC。将扩
【机 构】
：
中国医科大学基础医学院生理学教研室,北京三元基因工程有限公司
【基金项目】
：
北京市科技计划重大专项基金资助项目（D0205001040321）
论文部分内容阅读
目的通过定点突变,构建α干扰素-2bHis^58（IFNα-2bHis^58）,以期获得高效的新型药物分子。方法采用PCR体外定点突变技术,使α干扰素-2b基因的第58位密码子由GAA突变为CAC。将扩增片段克隆入pET23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）。表达的IFNα-2bHis^58经包涵体变复性、DEAE层析和CM层析纯化后,用WISH-VSV系统进行生物活性测定。结果IFNα-2bHis^58主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,IFNα-2bHis^5
其他文献
目的：观察丁酸钠（NaB）对体外培养的胃癌细胞系BGC823的生长抑制作用，并进一步探讨其作用机制。方法：应用MTT法检测细胞增殖活性；流式细胞仪检测细胞周期分布；Annexin V—FITC染色法
目的 为了深入研究人低氧诱导因子1α基因对冠心病的血管新生作用，构建人3突变型低氧诱导因子1α腺病毒表达载体（pAdeno-HIF-1α-Ala402-Ala564-Ala803）。方法双酶切pShutfle2-H
目的探讨高碘对大鼠皮质神经细胞凋亡的影响及其作用机制。方法将SD大鼠随机分为：对照组、高碘Ⅰ组、高碘Ⅱ组，分别以含碘量为5、5000、10000μg／L的自来水及普通饲料喂养6个月
目的阐明游泳应激后下丘脑室旁核（PVN）促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和血管加压素（AVP）基因转录的变化以及非生理剂量地塞米松对两基因转录的调节作用。方法生理盐水（100μl）或地塞
目的研究EphB4基因在喉鳞状细胞癌（喉癌）发生、发展中的生物学功能。方法应用RT—PCR和Westemblot的方法，以癌旁组织为参照检测EphB4基因在喉癌组织中的表达情况；应用差异聚合酶
目的研究高糖对肝星状细胞T6（HSC-T6）表达结缔组织生长因子（CTGF）、血小板衍化生长因子BB（PDGF．BB）及层黏蛋白（LN）、透明质酸（HA）的影响。方法按不同葡萄糖浓度进行分组，并设葡萄糖对照组
目的观察维生素A对弹性蛋白酶诱导大鼠实验性肺气肿的预防作用，及其对肺泡壁细胞增殖和凋亡情况的影响。方法Wistar大鼠24只随机分为3组：对照组，模型组，维生素A组，每组8只。实验之